In Splinter Cell stappen we in de schoenen van Sam Fisher, een geheime spion voor de nog geheimere organisatie Third Echelon. Als Sam Fisher zul je op vele missie gestuurd worden om de wereld te redden van terroristen. In deze missies is het van groot belang dat je zo ongezien mogelijk blijft. Splinter Cell introduceerd hierbij een uniek gamplay element dat je gebruik laat maken van het licht. Zit je in het donker, dan zal de vijand je moeilijk zien dan in het licht. Dit maakt het sluipen nog spannender.
Om ongezien te blijven kan Sam Fisher vele acrobatische bewegingen zoals het hangen aan pijpen, het geruisloos klimmen op verschillende kratten en een split-jump waarbij Sam in een spagaat tussen twee muren in gaat staan, klaar om op het hoofd van de vijand te springen. Heb je Splinter Cell uitgespeeld dan kun je extra levels downloaden via de Downloadable Content functie.